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采血卡完整協(xié)議
采血卡：
將濕潤(rùn)的12.5毫米圓盤放入旋轉(zhuǎn)柱中。 將12.5 mm收集盤用60μl1X洗脫緩沖液潤(rùn)濕后，使用細(xì)尖鑷子將圓盤放入旋轉(zhuǎn)柱中，將濕潤(rùn)的圓盤按入旋轉(zhuǎn)柱孔中
2.Allit全血卡自旋柱含有12.5mm收集盤，用60μl1X洗脫緩沖液潤(rùn)濕，置于含有60μl1X反應(yīng)緩沖液的1.5ml收集管中。 旋轉(zhuǎn)柱 - 收集管組件應(yīng)在室溫下孵育60分鐘，以使全血成分再水合，以進(jìn)行有效洗脫。
3.將旋轉(zhuǎn)柱置于含有60μl1X反應(yīng)緩沖液的1.5ml收集管中。 移取60μl1X反應(yīng)緩沖液到1.5 ml收集管的底部，將含有12.5 mm收集盤的旋轉(zhuǎn)柱放入1.5 ml收集管中，得到如圖4所示的組件。用收集管關(guān)閉旋轉(zhuǎn)柱蓋上并在室溫下孵育組件60分鐘，以徹底潤(rùn)濕收集盤上的全血樣品。 60分鐘的孵育步驟對(duì)于從收集盤獲得高產(chǎn)量的全血成分是至關(guān)重要的。
4.用蛋白質(zhì)微陣列反應(yīng)全血樣品60分鐘。 將印刷和封閉的蛋白質(zhì)微陣列基質(zhì)載玻片（1×25×76mm）置于雜交盒中，并與100μl全血樣品在37℃下以500rpm混合反應(yīng)60分鐘。 陣列板雜交站強(qiáng)烈推薦用于蛋白質(zhì)微陣列反應(yīng)和染色步驟。 在60分鐘反應(yīng)步驟后，使用PipetteIt TM 8通道高速分配器分配的250μl蛋白質(zhì)微陣列洗滌緩沖液快速連續(xù)洗滌微陣列6次。 在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上牢固地倒置并輕敲雜交盒，以去除殘留的洗滌緩沖液。
5.旋轉(zhuǎn)3分鐘以收集全血樣品并通過(guò)渦旋混合。 將旋轉(zhuǎn)柱 - 收集管組件放入高速微量離心機(jī)中，以14,000 xg離心3分鐘，從收集盤上洗脫全血成分，并進(jìn)入1.5 ml收集管底部的60μl1X反應(yīng)緩沖液中。 正確洗脫的全血樣品將顯示為深紅色120μl樣品，如圖5所示.120μl全血樣品應(yīng)使用中等渦旋混合5秒，以確保洗脫緩沖液，反應(yīng)緩沖液和全血的正確混合組件。
6.處理并掃描蛋白質(zhì)微陣列以獲得測(cè)試結(jié)果。 對(duì)于涉及抗體結(jié)合的蛋白質(zhì)微陣列，使用熒光第二試劑以1：5,000稀釋度在37℃下以500rpm混合使用陣列板雜交站將蛋白質(zhì)微陣列染色60分鐘。在步驟9中。染色后，使用PipetteIt TM 8通道高速分配器分配的250μl蛋白質(zhì)微陣列洗滌緩沖液快速連續(xù)洗滌微陣列6次。 從雜交盒中取出微陣列載玻片，在蒸餾水中浸泡3秒，在微陣列高速離心機(jī)中離心干燥5秒，并使用ArrayitInnoScan?掃描花青5通道中的熒光發(fā)射。微陣列掃描儀。 使用Mapix?軟件量化掃描圖像以獲得測(cè)試結(jié)果。
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