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采血卡干血紙片法的采樣、萃取流程
1)在收集卡中填寫(xiě)病人的姓名和采集日期等信息干血紙片法樣本采集卡樣式。由于戈謝病診斷需要檢測(cè)酶活力,故常采用具有蛋白保存功能的濾紙片進(jìn)行樣本采集,如Whatman 903濾紙片;
2)采血取樣??墒褂妹?xì)血管和靜脈血(可以使用EDTA或ACD抗凝劑,但應(yīng)避免使用肝素),注意不要使用含碘的消毒劑,在DBS卡的每個(gè)圈中滴一滴血,確保覆蓋整個(gè)圈切完全滲透該濾紙(血滴僅滴在濾紙的一面,不要在同一濾紙圓圈中重復(fù)滴上血液)。
3)為了保留酶的活性,首先必須在室溫下干燥4小時(shí)。干燥時(shí)保持濾紙懸空,水平固定在桌面邊緣,以保證充分干燥,注意使卡片遠(yuǎn)離直接的熱源或日光。為了避免交叉污染,一旦采集血樣后,勿將卡片重疊放置。在血斑完全干燥后,使用塑封帶將干燥收集卡進(jìn)行封裝,注意不要用手接觸血斑,以防樣本被污染。樣本一般為室溫保存及運(yùn)輸,如需長(zhǎng)期儲(chǔ)存,需深低溫(-70度)保存 。
4)用打孔器在樣品區(qū)截取一個(gè)小圓片,加入溶劑進(jìn)行洗脫。在打孔器打孔過(guò)程中,要嚴(yán)格按照卡紙圓圈進(jìn)行打孔,防止在打孔過(guò)程中樣本間相互污染而影響檢測(cè)結(jié)果。洗脫獲得的樣本可用于后續(xù)的儀器檢測(cè)。
基于以上操作原理和方法,國(guó)內(nèi)外已經(jīng)開(kāi)發(fā)了一批自動(dòng)化的干血紙片法采樣系統(tǒng)。通過(guò)自動(dòng)化設(shè)備可實(shí)現(xiàn)多樣本同時(shí)采集和萃取分析。